【摘要】  　　目的 探討藏藥川西獐牙菜的醇提物對小鼠免疫性肝損傷的影響，進一步評價其降酶、保肝護肝的作用。方法 采用尾靜脈注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)復制免疫性肝損傷模型，測定血清ALT、AST活性，計算肝臟、脾臟、胸腺質量指數。結果 川西獐牙菜的高、中、低劑量給藥組連用10d可顯著抑制免疫性肝損傷小鼠血清ALT、AST活性，并能有效防止BCG+LPS對小鼠各臟器的免疫性肝損傷。結論 川西獐牙菜預防性給藥能減輕免疫性肝損傷對小鼠肝臟的破壞，保護肝功能。

【關鍵詞】  免疫 肝損傷 川西獐牙菜 臟器指數 丙氨酸氨基轉移酶(ALT) 天門冬氨酸氨基轉移酶(AST) 小鼠

　　ABSTRACT: Objective  To observe the therapeutic effect of Swertia mussotii Franch is extracted by alcohol on immunological liver injury in mice, and further eva luate its immun-regulating effect in decreasing aminotransferase and protecting heptocytes. Methods  BCG vaccine and lipopolysaccharide were intravenously injected to establish liver injury model. The effects of Swertia mussotii Franch on liver injury were contrasted. Results  The high-, medium- and low- dose Swertia mussotii Franch groups which had been administered for 10 consecutive days, had significantly inhibited serum ALT and AST acticities of immunological liver injury; Swertia mussotii Franch could effectively prevent immunological liver injury by BCG+LPS. Conclusion  Swertia mussotii Franch can protect mice from immunological liver injury and protect the function of liver.
　　
　　KEY WORDS: immunity; liver injury; Swertia mussotii Franch; organ index; alanine aminotransferase (ALT); aspartate aminotransferase (AST)

　　藏藥川西獐牙菜(swertia mussotii franch)，藏藥名桑蒂或蒂達，始載于藏醫藥書《四部醫典》，有清熱、解毒，清肝利膽的功效，在歷代的藏醫藥著作如《晶珠木草》、《鮮明注釋》等均有記載。川西獐牙菜屬龍膽科(gentianaceae)獐牙菜屬(swertia)，為青藏高原特有種［1］，分布于西藏和青海海拔3 800-5 000 m的高寒地區，為一年生草本，全草入藥，是傳統的名貴藏藥，俗稱“藏茵陳( Zang Yin Chen, ZYC)”。研究資料表明，川西獐牙菜中主要含有獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、芒果苷、齊墩果酸等物質［2-3］，其中抗肝炎有效成分主要為齊墩果酸和芒果苷［2］。這些成分中的齊墩果酸、芒果苷、環烯醚萜苷類具有降酶、利膽、鎮痛等作用［4］。

　　本實驗通過觀察藏藥川西獐牙菜對免疫性肝損傷小鼠的臟器指數及常用肝功能生化指標丙氨酸氨基轉移酶(alanine aminotransferase, ALT)和天冬門氨酸氨基轉移酶(aspartate aminotransferase, AST)的影響，進一步了解藏藥川西獐牙菜的藥理作用，為利用藏藥川西獐牙菜這一青海寶貴資源、開發新藥及保健品，提供一定的科學依據。

　　1  材料與方法

　　1.1  實驗動物

　　昆明種小鼠，雄性，6-8周齡，體重(20±2)g，由蘭州實驗動物研究所提供。

　　1.2  藥品及試劑

　　卡介苗(bacillus calmette guerin, BCG)為衛生部上海生物制品研究所產品；脂多糖(lipopolysaccharide, LPS, E.coli. 055:B5)為美國Sigma公司產品；ALT、AST測定試劑盒為南京建成生物工程研究所產品。

　　1.3  方法論文發表網

　　1.3.1  BCG和LPS誘導免疫性肝損傷(ILI)模型的制備 
　　參照文獻方法［5-16］，模型組小鼠于造模第1天尾靜脈注射125 mg/kg BCG溶液(約含5.0×107個活菌數)，10 d后再次尾靜脈注射375 μg/kg LPS溶液進行攻擊，經LPS攻擊后小鼠開始禁食，但自由飲水。通過檢測肝功能指標ALT和AST活性明顯上升，符合BCG+LPS造模特點，判定造模成功。
1.3.2  分組設計及用藥方案

　　將小鼠隨機分成5組，每組20只。即：正常組、模型組、川西獐牙菜高劑量組、川西獐牙菜中劑量組、川西獐牙菜低劑量組。試驗用藥劑量按照徐叔云等［17］的配藥劑量進行換算，換算公式如下：
   
　　dB=dA×RBRA×WAWB13
   
　　公式中dA、dB是A、B兩種動物的每公斤體重劑量。RA、RB是動物體型系數，可由書中查到，WA、WB是動物的體重(kg)值。川西獐牙菜高、中、低劑量組按每60 kg人需生藥量分別為10 g、5 g、1 g計算，再運用上面的換算公式得到每20 g小鼠需生藥量高、中、低劑量組分別為28.364 2 mg、14.182 2 mg、2.836 4 mg。實驗的溶劑用吐溫80、食用油、蒸餾水以1∶1∶8比例混合而成。用藥方案：除正常組小鼠外，其余各組動物于第1天給藥前1 h鼠尾靜脈注射(靜脈注射)BCG生理鹽水溶液(約含5.0×107個活菌數) 0.2 mL/只，從造模第1天起，按0.2 mL/20 g體重分別灌胃高、中、低劑量的藥物，正常組和模型組給予等量溶媒，每天1次，連續10 d，末次給藥1 h后鼠尾靜脈注射LPS生理鹽水溶液(含7.5 μg)0.2 mL/只，然后禁食16 h后，眼眶采血，測血清ALT、AST，處死動物剖取肝臟、脾臟、胸腺稱重，計算其質量指數。

　　1.3.3  小鼠免疫器官指數—肝臟指數、脾臟指數和胸腺指數的測定

　　稱小鼠體重，頸椎脫臼處死小鼠，剝離肝臟、脾臟和胸腺，分別稱其濕重，肝臟、脾臟和胸腺的質量與小鼠體重的比值為肝臟指數、脾臟指數、胸腺指數。計算公式：肝臟、脾臟、胸腺指數=肝臟、脾臟、胸腺重量(mg)/小鼠體重(g)。教師論文發表

　　1.3.4  小鼠生化指標ALT/GPT和AST/GOT活性的測定—賴氏法

　　小鼠眼眶取血，離心獲取血清，按產品說明書操作檢測。

　　1.4  統計學處理

　　本實驗所有數據用SPSS10.0統計軟件包中的ANOVA法進行單因素方差分析處理，實驗數據均采用均數±標準差(±s)表示